背景:
支原体(Mycoplasma)是对支原体科、无胆甾原体科和螺原体科的原核微生物总称,是已知可以自由生活的最小生物,没有细胞壁,形状多样可变,直径一般是0.1~0.3μm,基因组A-T含量高, 对常见的抗生素不敏感,对热敏感。目前已从污水、植物、动物、禽类、昆虫、人、温泉或其他高温环境中发现200种左右支原体。
细胞如果受到支原体污染,细胞生长速度变慢,细胞产生病变或形态改变。连续培养细胞污染的概率大约15~35%,主要来源于20多种支原体,包括口腔支原体(M.orale)、肺炎支原体(M. pneumoniae)、发酵支原体(M. fermentans)、精氨酸支原体(M. arginini)、莱氏无胆甾原体(A. laidlawii)和猪鼻支原体(M. hyorhinis)。此外,不少种类支原体是致病的病原体,也有研究显示支原体与癌症有关。
人员操作、污染的细胞、原辅料(血清、胰酶、培养基),实验环境污染(生物安全柜、细胞间,培养箱)、实验仪器(水浴锅、液氮罐)、实验耗材(培养皿、方瓶、细胞工厂)都可能是污染源。污染了的细胞一方面对生产带来巨大影响,另外如果细胞产品、蛋白产品、病毒类产品受到支原体污染,最终会给患者带来潜在的健康风险。因此,监管部门要求企业对细胞库,检定用细胞和产品进行支原体检测,从源头上进行控制,尽早发现,确保放行产品不含支原体。对此,全球各国药物监管部门也发布了支原体检测相关指南,检测方法主要包括荧光染色法、培养法、核酸扩增法和生化检测方法。
概述:
Rhinogen® MycoAlarmTM支原体检测试剂盒说明书采用了生化方法进行支原体检测。利用支原体特有的ATP合成相关酶,在底物存在的情况下可以转化ADP为ATP。存活的支原体溶解后,释放大量的酶与底物反应,促进ADP转化为ATP,提供一种快速、灵敏的样品检测方法。通过对比加入底物后样品ATP含量的变化检测,即可通过前后含量变化比例来确定有无支原体。反应如下:
包装规格:
Rhinogen® MycoAlarmTM支原体检测试剂盒包装规格如下:
目录号 | 规格 |
RA-MT01 |
25T |
RA-MT01 |
50T |
RA-MT01 |
100T |
试剂包装:
组分 |
编号 |
装量 |
||
25T |
50T |
100T |
||
MycoAlarmTM检测试剂 |
RA-MT01A |
1×3ml |
2×3ml |
4×3ml |
MycoAlarmTM底物试剂 |
RA-MT01B |
1×3ml |
2×3ml |
4×3ml |
支原体阳性对照(冻干粉) |
RA-MT02 |
1×1ml |
1×1ml |
1×1ml |
MycoAlarmTM测定缓冲液 |
RA-MT01C |
1×8ml |
2×8ml |
3×8ml |
产品特性:
保存条件:
1. 试剂盒2~8℃保存,请勿冻存。
2. 试剂盒复溶后置室温(18°C-22°C)使用。未用完试剂可以分装,置-20℃保存6个月。为了保证产品稳定性,复溶后的试剂可以置-80℃保存。避免试剂反复冻融,试剂使用前请恢复室温。